Протокол исследования бактерицидного действия стоков и гомеопатических форм «Меркурида»

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ УКРАИНЫ
НАЦИОНАЛЬНЫЙ УНИВЕРСИТЕТ им.МЕЧНИКОВА

Кафедра микробиологии и вирусологии

ПРОТОКОЛ исследования бактерицидного действия стоков
и гомеопатических форм Меркурида

Введение

В процессе использования антибиотиков к ним может развиваться устойчивость микроорганизмов. Возможна так называемая перекрестная устойчивость, которая относится не только к применяемому препарату, но и к другим антибиотикам, сходным с ним по химическому строению. Вероятность развития устойчивости уменьшается, если дозы и длительность введения антибиотиков оптимальны, а также при рациональной комбинации антибиотиков. Если к основному антибиотику возникла устойчивость, его следует заменить другим, «резервным», антибиотиком.

Рассматривая спектр побочного действия антибиотиков на человеческий организм, следует отметить, что частота осложнений от антибиотикотерапии неуклонно возрастает. И осложнения носят, прежде всего, аллергический характер. Так, до 1951 г. в литературе был описан единственный случай анафилактического шока со смертельным исходом на введение антибиотика. В настоящее время побочные явления от антибиотикотерапии регистрируются в 37-63% случаев, причем 89,4% из них составляют аллергические реакции (сывороточная болезнь, крапивница, ангионевротический отек, анафилактический шок, контактные дерматиты и др.).

Кроме того, антибиотики могут обладать побочными свойствами неаллергической природы и токсическим действием. Результатом прямого раздражающего действия антибиотиков являются диспепсические явления (тошнота, рвота, понос), болезненность на месте внутримышечного введения препарата, развитие флебитов и тромбофлебитов при внутривенных инъекциях антибиотиков. Неблагоприятные эффекты возможны также со стороны печени, почек, кроветворения, слуха, вестибулярного аппарата и др.

Для многих антибиотиков типично развитие суперинфекции (дисбактериоз), которая связана с подавлением антибиотиками части сапрофитной флоры, например пищеварительного тракта. Последнее может благоприятствовать размножению других микроорганизмов, не чувствительных к данному антибиотику (дрожжеподобных грибов, протея, синегнойной палочки, стафилококков). Наиболее часто суперинфекция возникает на фоне действия антибиотиков широкого спектра действия.

Кожные покровы и слизистая оболочка организма заселены различными видами микроорганизмов, которые образуют с макроорганизмом единую целостную экологическую систему. Состав и состояние микрофлоры зависят от макроорганизма, но, в свою очередь, и микрофлора, особенно толстого кишечника, оказывает существенное и многоообразное влияние на макроорганизм. Ее воздействие на макроорганизм проявляется в следующем:

1. Она является одним из важных факторов естественной резистентности организма, т.к. проявляет высоко антагонистическое действие по отношению к другим, в т.ч. патогенным бактериям, препятствуя их размножению в организме.

2. Микрофлора своими антигенными факторами стимулирует развитие лимфоидной ткани организма и, таким образом, также способствует развитию неспецифической и опосредованной специфической резистентности.

3. Микрофлора, особенно толстого кишечника, участвует в процессах пищеварения, в т.ч. в обмене холестерина и желчных кислот.

4. Важная роль микрофлоры заключается также в том, что она обеспечивает организм человека различными витаминами, которые синтезируются ее представителями (витамины В1, В2, В6, В12, К, никотиновая, пантотеновая, фолиевая кислоты и др.). Эти витамины обеспечивают большую часть потребностей в них организма.

Однако представители нормальной микрофлоры не всегда приносят только пользу. При определенных условиях, в частности при воздействии факторов, снижающих естественную резистентность, практически все представители нормальной микрофлоры, за исключением бифидумбактерий, могут стать виновниками различных эндогенных инфекций, чаще всего гнойно-воспалительных заболеваний с различной локализацией (ангины, менингиты, циститы, отиты, сепсисы, нефриты, аппендициты, абсцессы, флегмоны и т.п.).

Исходя из вышесказанного, возникает необходимость в создании новых лекарственных препаратов, обладающих бактерицидной активностью по отношению к условнопатогенным микроорганизмам и не оказывающих угнетающего действия на нормальную микрофлору человека.

На кафедре микробиологии и вирусологии Одесского национального университета им. И.И. Мечникова было проведено исследование, направленное на выявление бактерицидных свойств различных форм «Меркурида» (стоков) — комплекса ртути с цистеином (Меркурид С, сток), комплекса ртути с метионином (Меркурид М, сток), впервые полученного автором и находящегося в стадии исследования и патентования этилендиаспарагината Hg (II), а также гомеопатических лекарств, полученных на их основе по фармакопеи Швабе и соответственно обозначенных Меркурид С гом. и Меркурид М гом.

Материалы и методы
В качестве тест-микроорганизмов использовали музейные штаммы условнопатогенных микроорганизмов и представителей нормальной микробиоты человека Staphylococcus aureus ОГУ-223, Candida albicans, Escherichia coli УКМ В-906, Pseudomonas aeruginosa ОГУ-211, Enterobacter faecalis, «actobacillus fermentum 158.
Исследование проводили методом лунок.
Для исследования суточные тест-культуры микроорганизмов засевали плотным газоном на питательный агар (лактобациллы на среду MRS). После этого стерильным пробойником диаметром 1 см проделывали лунки, в которые вносили 0,2 мл исследуемого вещества.
Посевы инкубировали в термостате в течение 48 ч при Т=37°С.

Результаты и обсуждение
Результаты учитывали через 24 и 48 ч, измеряя зоны задержки роста тест-культур микроорганизмов, которые выражали в мм.
В результате проведенной работы выявлено, что сток Меркурида М и этилендиаспарагинат Hg (II) проявляли бактерицидное действие в отношении всех исследуемых тест-культур микроорганизмов. В наибольшей степени оно выражалось в отношении S. аureus — зоны задержки роста при действии стока Меркурида М и этилендиаспарагината Hg (II) составили соответственно 8 и 12 мм. Зоны задержки роста дрожжеподобных грибов C. аlbicans и E. сoli составили 4 и 8 мм при действии первого вещества и 5 и 7 мм — при действии второго. Данные препараты угнетали рост P. аeruginosa — зоны задержки роста составили 2 и 4 мм соответственно.
Сток Меркурида С, оказывал бактерицидное действие на следующие тест-культуры микроорганизмов: Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Enterobacter faecalis. Зоны задержки роста при действии данного вещества составили 6, 3 и 7 мм соответственно.
На бактерии рода «actobacillus — представителей нормальной микробиоты человека — аллопатические и гомеопатические формы Меркурида бактериостатического и бактерицидного действия не оказывали.

Обращает на себя внимание, что сток Меркурида М и этилендиаспарагинат Hg оказывает бактерицидное действие на штамм Pseudomonas aeruginosa, устойчивый ко многим антибиотикам различного спектра действия.
Сравнительная характеристика бактерицидного действия различных форм Меркурида (стоков) представлена в табл.
Таблица 1
Сравнительная характеристика бактерицидного действия
различных форм Меркурида (стоков)
(согласно зонам задержки роста)

Примечания:
«+» — слабо выраженное бактерицидное действие (зоны задержки роста до 3 мм);
«++» — умеренное выраженное бактерицидное действие (3-7 мм);
«+++» — сильно выраженное бактерицидное действие (8-12 мм и выше);
«-» — отсутствие какого-либо бактерицидного действия.

ВЫВОДЫ

В результате исследования впервые выявлено бактерицидное действие аллопатических форм Меркурида на штаммы условнопатогенных микроорганизмов видов Staphylococcus aureus, Candida albicans, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter faecalis.
Аллопатические и гомеопатические формы Меркурида не проявляли бактериостатического и бактерицидного действия в отношении представителей нормальной микробиоты человека.